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長期食用開菲爾發酵乳Kefir(芯蕊康)改善自發性高血壓大鼠內皮細胞受損之功能

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【摘要】:
转化医学杂志(2015)13:390DOI10.1186/s12967-015-0759-7長期食用開菲爾發酵乳Kefir(芯蕊康)改善自發性高血壓大鼠內皮細胞受損之功能【摘要】開菲爾粒發酵製成之發酵乳飲品具有改善多種疾病之健康促進功效,然而,目前仍不清楚它是否可對高血壓與內皮細胞受損帶來改善。本文主要透過自發性高血壓大鼠(SHR)分析開菲爾發酵乳對受損的內皮細胞功能與循環系統之改善。分別以安慰劑

转化医学杂志(2015) 13:390

DOI 10.1186/s12967-015-0759-7

長期食用開菲爾發酵乳Kefir(芯蕊康)改善自發性高血壓大鼠內皮細胞受損之功能

【摘要】開菲爾粒發酵製成之發酵乳飲品具有改善多種疾病之健康促進功效,然而,目前仍不清楚它是否可對高血壓與內皮細胞受損帶來改善。本文主要透過自發性高血壓大鼠(SHR)分析開菲爾發酵乳對受損的內皮細胞功能與循環系統之改善。分別以安慰劑與開菲爾發酵乳(0.3mL/100g體重)餵食SHR大鼠,並在餵食的7153060天時進行分析,測試主動脈弓對乙醯膽鹼誘導之舒張反應。此外。再以具專一性之抑制劑處理搭配乙醯膽鹼誘導舒張反應,分析自由基(ROS)與一氧化氮合成酶比例之影響,最後以流式細胞儀分析內皮細胞與內皮前趨細胞(NPC)之變化。實驗顯示長期食用開菲爾發酵乳60天後,可使SHR過高之血壓降低15%,同時改善SHR主動脈弓對乙醯膽鹼誘導舒張反應流式細胞儀結果顯示,開菲爾發酵乳可避免SHR大鼠動脈弓中內皮細胞數量減少,主要係透過減少自由基產生與提升一氧化氮利用率。掃描式電子顯微鏡分析發現開菲爾發酵乳可保護SHR血管內皮,避免產生傷口或促進傷口的修復。綜合上述,長期食用開菲爾發酵乳可以恢復循環系統中自由基與一氧化氮之平衡,維持內皮細胞結構來改善血管內皮功能。

关键词开菲尔;益生菌;自发性高血压小鼠;氧化应激;内皮功能障碍

Chronic administration of the probiotic kefir improves the endothelial function in spontaneously hypertensive rats

Andreia G. F. Friques1, Clarisse M. Arpini1, Ieda C. Kalil1, Agata L. Gava2, Marcos A. Leal3, Marcella L. Porto3,5, Breno V. Nogueira4, Ananda T. Dias3, Tadeu U. Andrade1, Thiago Melo C. Pereira1,5, Silvana S. Meyrelles3, Bianca P. Campagnaro1 and Elisardo C. Vasquez1,3*

Abstract

Background: The beverage obtained by fermentation of milk with kefir grains, a complex matrix containing acid

bacteria and yeasts, has been shown to have beneficial effects in various diseases. However, its effects on hypertension and endothelial dysfunction are not yet clear. In this study, we evaluated the effects of kefir on endothelial cells and vascular responsiveness in spontaneously hypertensive rats (SHR).

Methods: SHR were treated with kefir (0.3 mL/100 g body weight) for 7, 15, 30 and 60 days and compared with non-treated SHR and with normotensive Wistar-Kyoto rats. Vascular endothelial function was evaluated in aortic rings through the relaxation response to acetylcholine (ACh). The balance between reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) synthase was evaluated through specific blockers in the ACh-induced responses and through flow cytometry in vascular tissue.

Results: Significant effects of kefir were observed only after treatment for 60 days. The high blood pressure and

tachycardia exhibited by the SHR were attenuated by approximately 15 % in the SHR-kefir group. The impaired AChinduced relaxation of the aortic rings observed in the SHR (37 ± 4 %, compared to the Wistar rats: 74 ± 5 %), was significantly attenuated in the SHR group chronically treated with kefir (52 ± 4 %). The difference in the area under the curve between before and after the NADPH oxidase blockade or NO synthase blockade of aortic rings from SHR were of approximately +90 and ?60 %, respectively, when compared with Wistar rats. In the aortic rings from the SHR-kefir group, these values were reduced to +50 and ?40 %, respectively. Flow cytometric analysis of aortic endothelial cells revealed increased ROS production and decreased NO bioavailability in the SHR, which were significantly attenuated by the treatment with kefir. Scanning electronic microscopy showed vascular endothelial surface injury in SHR, which was partially protected following administration of kefir for 60 days. In addition, the recruitment of endothelial progenitor cells was decreased in the non-treated SHR and partially restored by kefir treatment.

Conclusions: Kefir treatment for 60 days was able to improve the endothelial function in SHR by partially restoring

the ROS/NO imbalance and the endothelial architecture due to endothelial progenitor cells recruitment.

Keywords: Kefir, Probiotics, Spontaneously hypertensive rat, Oxidative stress, Endothelial dysfunction

二、背景

    內皮細胞機能在維持循環系統恆定與心血管健康中扮演相當重要的角色,內皮細胞的損傷亦被認為是代謝性疾病與動脈高血壓的重要特徵。多數研究都是使用自發性高血壓大鼠(Spontaneous hypertensive rat, SHR)為疾病動物模式來探討內皮細胞功能與損傷。SHR大鼠可發現內皮細胞損傷引發血管舒張異常、NADPH氧化驅動的自由基產生增加一氧化氮生物利用性減少。因此SHR大鼠是科學界研究高血壓與血管內皮損之重要疾病模式,發非藥物心血管保健原料,如機能性食品原料與功能性食品,投入於心血管疾病之預防或控制。

    機能性食品必須是透過科學驗證或人體臨床測試,證實具有一種或多種健康促進功能之產品。具心血管保健機能性之食品多以SHR大鼠試驗或輕微高血壓患者之臨床測試來驗證其功效。在已知具有明確科學驗證之機能性食品中,包含開菲爾發酵乳內的乳發酵物相當受到矚目的類別。開菲爾發酵乳源自於北高加索山區並廣為流傳世界各地,當各地名為開菲爾的產品已逐漸商業化之時,巴西的開菲爾發酵乳製作仍維持以完整開菲爾粒進行的家庭手作工法,尚無商業化的產品。開菲爾粒主要由多種乳酸菌酵母菌及乙酸菌株組成,發酵後飲品可稱為開菲爾或開菲爾發酵乳,其中的活菌與代謝產物均具有相當大的健康促進價值。

    過去以人體臨床試驗或動物試驗之研究揭露,益生菌對血壓調控具有潛在應用價值,並且發現主要透過修復受損的內皮細胞來改善血壓與心血管疾病相關的缺陷。然而,目前尚缺乏研究證實開菲爾發酵乳是否具有改善血管內皮受損之生物活性。因此,我們冀望透過利用SHR大鼠分析開菲爾發酵乳是否可調節高血壓及修復內皮細胞之損傷。實驗結果可知,隨著服用開菲爾發酵乳的時間越長,SHR血管功能與結構修復效果越顯著,進一步研究發現:開菲爾發酵乳對循環系統的改善功效,要是透過抑制自由基產生活化一氧化氮生物利用性來達到,同時驅使內皮前趨細胞(EPC)修復受損的血管內皮。

 

三、實驗結果

3.1 鑑定本團隊持有之開菲爾粒菌元組成與發酵乳之菌相

    當開菲爾粒自高加索地區往世界各地流傳,各地開菲爾粒之菌相組成隨著來源、環境、培養工法不同而逐漸產生差異,我們首先隨機挑選實驗室使用的開菲爾粒,經微生物分析鑑定其中優勢菌種包含:Acetobactor aceti, Acetobactor sp., Lactobacillus delbrueckii delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus fructivorans, Enterococcus faecium, Leuconostoc spp.。此外,在本團隊使用之開菲爾粒所含活菌數為7.5*107 CFU/mL

透過顯微鏡分析開菲爾粒之菌相組成,圖1a為低倍率顯微鏡視野下的開菲爾粒外觀。圖1b~1f為掃描式電子顯微鏡視野觀察之開菲爾粒,1b可知開菲爾粒外側由各種不同的益生菌緊密結合包裹著;進一步利用高倍率視野可觀察到外由乳酸桿菌與多醣體緊密結合形成一屏障(1c&1d),而開菲爾粒內部主要則以卵圓形的酵母菌為主(1e&1f)

3.2 開菲爾發酵乳改善血壓與心跳

    相較於正常WKy野生型大鼠血壓(98-102mmHg)SHR大鼠血壓在成年後會逐漸升高至162-169mmHg。以開菲爾發酵乳處理達71530能調降血壓,而在餵食至60天時觀察到血壓的顯著下降(2a)。此外,未處理SHR大鼠亦有心跳過度加快的現象,同樣必須長期餵食至60天後才可顯著降低SHR大鼠心跳 (2b)

3.3 開菲爾發酵乳對SHR血管內皮受損之修復

    3呈現各組大鼠主動脈弓受乙醯膽鹼誘導後,在不同時間點之舒張反應。不同時間點之WKy野生型大鼠主動脈弓受乙醯膽鹼誘導後呈現正常之舒張反應曲線。而SHR大鼠主動脈弓在乙醯膽鹼誘導之舒張反應顯著受損,舒張反應僅達對照組的50%。我們進一步分析各組大鼠主動脈弓最大反應率(3b)、曲線與起始點之間區域(3c, 代表曲線下降幅度)、與敏感度(3d)SHR大鼠在各項指標均顯著遜於WKy大鼠,顯示SHR大鼠主動脈弓受乙醯膽鹼誘導之舒張反應受損。有趣的是,長期餵食開菲爾發酵乳的SHR大鼠可以逐漸改善之各項指標60未能恢復至WKy大鼠水平,但與未處理SHR大鼠相比則已出現顯著性改善。

3.4 自由基在血管內皮細胞受損之角色

    NAPDH氧化酶會產生超氧歧化物(即自由基),本實驗利用apocynin抑制NADPH氧化酶阻斷自由基產生,進而分析自由基對乙醯膽鹼誘導主動脈弓舒張反應之影響,探討自由基產生在內皮細胞調控血管舒張之角色。三組大鼠分別先apocynin處理,取其主動脈弓分析對不同濃度乙醯膽鹼誘導舒張反應。結果顯示apocynin處理Wky大鼠對乙醯膽鹼誘導舒張反應具有輕微影響,但無顯著差異。有趣的是,apocynin處理之SHR大鼠主動脈弓在乙醯膽鹼誘導反應發現,阻斷自由基產生可恢復其對乙醯膽鹼誘導之反應,且幾乎與WKy大鼠結果相仿;未有apocynin處理維持乙醯膽鹼誘導舒張反應之缺損,顯示SHR大鼠內皮細胞功能受損極可能肇因於過多自由基產生。此外,以開菲爾發酵乳處理可發現,在有無apocynin處理之兩組SHR大鼠的舒張反應差別縮小(但仍為顯著差異),顯示在沒有apocynin處理情況下,我們可以透過開菲爾發酵乳減自由基產生來避免血管內皮功能受損,因此有無apocynin處理的差異較小。

3.5 分析主動脈弓內皮細胞數量與血清自由基產生

    進一步分析開菲爾發酵乳如何為內皮細胞帶來效益,我們利用DHEDCFHPF三種探針分析血清中?O2-H2O2ONOO-/?O2-三種自由基含量,並以流式細胞儀分析主動脈弓中內皮細胞數量。在不同時間點分析發現,大鼠血清中自由基會隨著老化逐漸增加,而在SHR大鼠體內,其血清中自由基含量在7明顯高於WKy大鼠。若以開菲爾發酵乳餵食,發現隨著食用開菲爾發酵乳時間越長,開菲爾發酵乳抑制SHR大鼠血清中自由基產生的效果越好。

    我們進一步利用流式細胞儀分析主動脈弓中的內皮細胞數量(CD31+細胞)與一氧化氮產生,三組動物主動脈弓中內皮細胞數量在7並無差異,SHR大鼠內皮細胞數量會隨著時間的流逝而略微減少,並於第60天時顯著低於 WKy大鼠。但若長期餵食開菲爾發酵乳,不僅避免SHR大鼠內皮細胞數量減少,甚至在第30天後開始增加,並於第60顯著高於WKy大鼠。相同的趨勢也發現在內皮細胞產生一氧化氮的能力上,WKy大鼠與與SHR大鼠的一氧化氮產生在60天的實驗觀察中均持平,但長期餵食開菲爾發酵乳可在第30天後明顯增加一氧化氮之產生,並於第60天顯著高於其他兩組

3.6 SHR大鼠內皮細胞受損機轉-一氧化氮合成酶所扮演的角色

    為了瞭解開菲爾發酵乳改善內皮細胞功能之作用機轉,進一步分析三組主動脈弓內皮細胞一氧化氮/cGMP分子機轉是否扮演重要角色,透過L-NAME(一氧化氮合成酶抑制劑)分析主動脈弓被乙醯膽鹼誘導之舒張反應。圖6A之曲線圖表示,在有L-NAME存在情況下,WKy大鼠主動脈弓對乙醯膽鹼誘導舒張反應效果大幅降低,其舒張反應最高僅11% (此殘存的舒張應是透過前列腺素誘導血管舒張之PGI2)。如同預期一般,L-NAME抑制劑作用在SHR大鼠中反而帶來輕微血管收縮之結果。若以開菲爾發酵乳長期餵養則可避免乙醯膽鹼誘導之收縮反應,並促進非常些微之舒張(6B)。上述結果顯示,NO/cGMP機轉在正常個體對乙醯膽鹼產生血管舒張的過程中扮演重要角色,而SHR大鼠體內應有其他機轉參與調控主動脈弓之舒張,且可透過長期餵食開菲爾發酵乳來改善。圖6d則在L-NAME前處理階段,透過PE處理誘導主動脈弓收縮,進而評估基本的NO/cGMP活化。結果顯示在SHR組大鼠的最大收縮情況顯著低於WKy大鼠,而長期餵食開菲爾發酵乳則可改善之。

3.7 掃描式電子顯微鏡觀察血管內皮結構

    上述實驗成果顯示,SHR組的內皮細胞應發生受損而導致其功能喪失,因此我們以掃描式電子顯微鏡分析各組血管內皮層結構。發現血壓正常之WKy大鼠主動脈弓內皮層的細胞排列平滑、整齊。相反的,高血壓之SHR大鼠主動脈弓內皮層則有明顯內皮細胞損傷,甚至顯露出下方彈性層。若以開菲爾發酵乳長期餵養,可觀察到少數損傷存在與再生之內皮細胞,代表開菲爾發酵乳處理可以明顯降低SHR大鼠內皮細胞之損傷

3.8 開菲爾發酵乳吸引循環系統鐘內皮前趨細胞

   利用流式細胞儀分析三組大鼠週邊血液中CD117+/CD31+雙陽性之內皮前趨細胞(EPC)數量。結果顯示在SHR組大鼠週邊血液內的EPC顯著下降(86+11),而開菲爾發酵乳餵食則可增加SHR大鼠的EPC數量(134+7, P<0.05),但仍低於正常大鼠體內的EPC(207+23個,P<0.01)

3.9 開菲爾在非內皮細胞誘導舒張之角色

    本實驗證實開菲爾發酵乳可有效改善SHR大鼠內皮細胞之功能,我們進一步分析不同時間點血管平滑肌細胞對一氧化氮提供者-SNP之舒張反應,藉以了解血管中不同細胞族群對開菲爾發酵乳之反應。結果顯示,SHR大鼠主動脈弓平滑肌細胞對一氧化氮供給(SNP)造成的舒張反應顯著遜於WKy組,但差異不似若血管內皮受損之幅度。以開菲爾發酵乳長期餵食後,無法修復SHR大鼠對於SNP誘導之舒張反應,顯示開菲爾發酵乳對於血管之功能性調節主要是透過修復內皮細胞損傷達到的,而非血管中平滑肌細胞。

 

四、討論

    本研究主要利用SHR大鼠主動脈弓對乙醯膽鹼的舒張反應探討開菲爾發酵乳對心血管系統之影響,主要分析因NO/ROS平衡破壞帶來之內皮細胞損傷,並發現長期食用開菲爾發酵乳可改善內皮細胞損傷。本實驗數據顯示開菲爾發酵乳對心血管系統的助益主要來自修復內皮細胞結構、降低氧化壓力、增加一氧化氮之生物利用率,進而恢復受損的內皮細胞功能。

4.1 開菲爾粒

    首先利用掃描式電子顯微鏡解析開菲爾粒結構,發現巴西常用的開菲爾粒由表面大小不一的乳酸菌與內部卵圓形酵母菌組成,與其他團隊研究相同。開菲爾粒主要由多醣體、蛋白質、與部分已鑑定菌種如Leucinostoc spp, Lactococcus spp, Lactobacillus spp.與酵母菌等組成。開菲爾粒除了鑑定出上述菌種外,也發現會主要產生多醣體(Kefiran)的菌株,如Lactobacillus Kefiranofaciens

4.2 開菲爾發酵乳對受損內皮細胞之修復功效應用於心血管疾病管理

    越來越多文獻指出,利用開菲爾粒發酵製成的發酵乳較一般單離菌株製成的發酵乳含有更豐富的活性成分與功能,如抗高血壓與抗高血脂之活性。長期飲用開菲爾發酵乳可以預防心血管疾病的發生或惡化,如調降血壓與減少中風之風險等,顯示此類品可作為心血管疾病患者在疾病控制管理時的機能性食物。而發酵乳中豐富且多元的活性成分,主要透過開菲爾粒中乳酸菌與酵母菌共生系統複雜的交互作用產生。目前有關開菲爾發酵乳與血壓調節文獻中,部分人體臨床或動物試驗之研究觀察到多醣體-Kefiran抗高血壓功效;而本研究則是以SHR疾病模式分析開菲爾發酵乳功效,發現長期食用開菲爾發酵乳可以降低SHR大鼠的高血壓與心跳過快。動脈高血壓諸多成因,內皮細胞功能受損不僅是主要成因更是其他心血管疾病的風險因子,因此我們聚焦開菲爾發酵乳對SHR大鼠內皮細胞受損功能之修復。

    目前科學界對開菲爾發酵乳中活性成分SHR大鼠內皮細胞功能之作用知之甚微,且結果不一致。本研究證實SHR大鼠主動脈弓對乙醯膽鹼誘導舒張反應較血壓正常的WKy大鼠差,此結論與部分團隊結果一致,但過去亦有不同論點者。本實驗用於誘導主動脈弓舒張之乙醯膽鹼使用量係參考文獻提及之高濃度乙醯膽鹼成功進行誘導(最高濃度不高於10-4 mol/L)或許乙醯膽鹼的濃度不同是各團隊結果方向不一致的主因。此外,本文主要貢獻係發現長期使用開菲爾發酵乳可對受損之SHR內皮細胞能帶來改善,並且調節高血壓與過快的心跳。顯示利用開菲爾發酵乳改善SHR大鼠損的內皮細胞,進避免動脈性高血壓的處理方式是合理的。

4.3 自由基產生與內皮細胞受損之關係

    動物體內皮細胞功能受損主要肇因於嚴重的自由基產生,而自由基的增加係因NAPDH氧化酶促進一氧化氮轉化為過氧化亞硝酸鹽,使一氧化氮生物利用率下降。目前包括SHR大鼠在內的數種動脈高血壓疾病模式觀察到自由基增加與一氧化氮減少,並造成血管內皮受損之情事。因此我們首先分析SHR大鼠體內自由基血管內皮傷害,並觀察開菲爾發酵乳是否可以改善損傷在乙醯膽鹼誘導主動脈弓舒張反應分析中,apocynin處理對WKy大鼠影響不大,顯示正各體內自由基產生有限。相較之下, apocynin阻斷SHR大鼠體內過多自由基產生,藉以改善血管內皮受損本實驗與其他文獻都指出氧化壓力升高與高血壓有密切關係,主要係因高的自由基產生造成血管內皮受損,進而引發血壓升高所致。文獻也提出若可減少高血壓或動脈硬化個體自由基產生,或許是一個可改善血管內皮受損之方法本實驗中,我們發現在有、無apocynin存在的情況下,長期餵食開菲爾發酵乳之SHR大鼠主動脈弓對於乙醯膽鹼的舒張反應差異較小,進一步證實開菲爾發酵乳改善血管損傷之功能是透過減少血管內自由基產生

4.4 一氧化氮的角色

    越來越多研究證實了體內氧化壓力對於血管內皮功能受損與高血壓之影響。本研究進一步提出長期食用開菲爾發酵乳可以降低主動脈弓自由基產生並增加一氧化氮的生物利用率,進而改善血管內皮功能,顯示開菲爾發酵乳非常適合作為心血管疾病長期食用之用的機能性食品。尤其,我們發現開菲爾發酵乳之長期處理除了增加一氧化氮利用之外,更可增加EPC數量,這對血管內皮層的修復相當重要!

    我們以L-NAME阻斷一氧化氮合成酶活性,減少一氧化氮產生以研究其對於內皮細胞功能之影響。以L-NAME處理可減少WKy大鼠主動脈弓乙醯膽鹼誘導舒張反應70%,但在SHR大鼠則僅觀察到35%的舒張反應減少,顯示在SHR大鼠體內,一氧化氮生成早已大幅下降,因此利用L-NAMESHR體內阻斷一氧化氮生成對舒張反應之影響有限。有趣的是,L-NAME幾乎完全阻斷了開菲爾發酵乳對主動脈弓舒張反應的改善,顯示增加內皮細胞一氧化氮利用是開菲爾發酵乳改善內皮細胞功能的重要機轉。此外,一氧化氮阻斷後仍可觀察到WKy大鼠10%的殘餘舒張反應及在SHR大鼠出現10%的收縮反應,但是在以開菲爾餵食的SHR大鼠則無。WKy大鼠殘餘的10%舒張反應可能來自前列腺素中血管舒張劑(PGI2)之貢獻;SHR大鼠觀察的10%收縮反應則可能是來自前列腺素血收縮劑(endoperoxidesthromboxaneprostaglandin E3)效果。

    在過往研究中,過高自由基產生可能會破壞內皮細胞的一氧化氮利用,造成血管內皮與其EPC功能受損。因此,我們進一步利用掃描式電子顯微分析主動脈弓內皮層的結構,並觀察到與預期一致的結果。結果顯示開菲爾發酵乳可以促進血管內皮層修復增加內皮細胞數量與目前對自由基與血管功能之關係的主流認知是一致。綜上所述,本文實驗顯示讓SHR大鼠長期食用開菲爾發酵乳可以減少自由基產生、恢復一氧化氮利用率、並且修復部分的主動脈弓內皮層。而在餵食開菲爾發酵乳之SHR大鼠中內皮細胞數量增加與內皮層修復之結果支持我們進一步觀察EPC之變化。

4.4 EPC的角色

    基於一氧化氮在EPC移動與功能的重要角色,本文發現開菲爾發酵乳促進更多一氧化氮的產生可能吸引EPC到血管內皮層受損處。此外,過去文獻曾發現高血壓受試者周邊血中的EPC數量下降,與我們的觀察一致。除了分析SHR大鼠中EPC的變化外,我們進一步發現長期食用開菲爾發酵乳可使SHR大鼠EPC數量回升。EPC與血管功能維護之研究指出過高氧化壓力與發炎反應間的交互作用會影響EPC的移動,進而導致內皮層表面剝落,加劇高血壓的發生。此外,其他文獻顯示一氧化氮可以促使EPC由骨髓移動至循環系統,前往內皮層受損處支援內皮修復。本文重要性在說明,開菲爾發酵乳可以顯著增加EPC進入循環系統,投入內皮層受損處之修復,以維持內皮功能與結構,並且是首篇提出高血壓體中血管內皮受損與EPC角色之文章。

    SHR模式中,血管平滑肌是否參與動脈性高血壓形成仍是一個有爭議的議題。雖有部分研究顯示SNP(一氧化氮提供者)作用在SHR大鼠血管平滑肌造成血管舒張異常,但有其他文獻提出相反結果。我們發現SNPWKy大鼠主動脈弓誘導的舒張反應隨著時間流逝而逐漸減低,但差異不大而在SHR大鼠觀察SNP誘導舒張反應較WKy大鼠輕微,顯示SHR大鼠體內動脈性高血壓亦有部分成因來自平滑肌的損傷此外,SHR大鼠在餵食開菲爾後未能改善SNP誘導的舒張反應,顯示開菲爾發酵乳改善動脈之功能與平滑肌細胞無關,更強化開菲爾發酵乳對於心血管系統之裨益主要來自對內皮細胞之影響

 

五、結論

    綜上所述,本文首先提出證據顯示開菲爾發酵乳可以避免SHR大鼠體內內皮細胞功能受損,主要係透過減少自由基產生與增加一氧化氮利用率。此外,開菲爾發酵乳更可促進EPC釋放至循環系統並投入血管內皮之修復。圖九歸納開菲爾發酵乳對於血管內皮受損之改善機轉。

   本實驗顯示開菲爾發酵乳可作為心血管疾病患者使用之機能性食品,藉以減緩疾病之惡化。本文中觀察到開菲爾發酵乳抗氧化壓力功能可能透過其中益生菌株可以減低循環系統中促發炎因子的產生,進而達到抗氧化與抗發炎之效果。過往文獻提及Lactobacillus Kefiranfaciens可以改善SHR大鼠心血管健康功能,而此乳酸桿菌株也是本文發酵乳中重要的菌種未來仍需更多研究來分析開菲爾發酵乳中真正為血管內皮受損帶來改善的功效成分,以進一步將開菲爾發酵乳開發為可用之功能性食品。

 

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